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  • 產品名稱:兔肝Kuffer細胞

  • 產品型號:FS-016469
  • 產品**:撫生
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簡單介紹:
兔肝Kuffer細胞采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
詳情介紹:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。

產品名稱 兔肝Kuffer細胞
規格 詳見說明書
貨號

FS-016469

培養操作步驟 :

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片完全浸在培養液中; 

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應該為玻璃**,并經過鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養方法:

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

細胞處理方法:

產品名稱以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。

一.貼壁細胞

客戶接收到細胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養瓶外部。

肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。

顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。

嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2  培養。

二.懸浮細胞

1. 接收到細胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。

3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒)。

5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2  培養。


Medium 125 with methanol 大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA Kit

pcDNA4/V5-His B(pcDNA4V5HisB) 大腸桿MDS42

人壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA Kit pFLAG-MACpFLAGMAC

大提柱式酵母DNAout(見關聯產品) 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA Kit

pOSIP-TH M13mp18DNAA

Scharen berg 三重浸染法神經組織染色試劑盒 pSK434

大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA Kit MES Buffer,1.0M,pH5.0

Desulfitobacterium (pce ii) medium 人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA Kit

pASZ10 Soil extract medium

人酸軟骨素(CS)ELISA Kit pECFP-NucpECFPNuc)(60908-2553

動態濁度法內定量試劑盒(見關聯產品) 小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit

pMCSG10 (linearized) dNTP溶液(標記專用)

Trypan red(曲利本紅、錐蟲紅、錐紅) pSAR-MT(pSARMT)

七葉皂苷鈉 英文名稱:Seven yezao sodium 規格::100mg 保存::-20℃,避光

卡替洛爾 英文名稱:Kati Carol hydrochloride 規格::50mg 保存::-20℃,避光

硫利達嗪 英文名稱:Thioridazine hydrochloride 規格::50mg 保存::-20℃,避光

兔肝Kuffer細胞妥拉唑林 英文名稱:Tolazoline hydrochloride 規格::50mg 保存::-20℃,避光

利多卡因 英文名稱:Lidocaine 規格::100mg 保存::-20℃,避光

利多卡因 英文名稱:Lidocaine hydrochloride 規格::100mg 保存::-20℃,避光

硝苯地平雜質B 英文名稱:Nifedipine impurity B 規格::30mg 保存::-20℃,避光

硝苯地平雜質A 英文名稱:Nifedipine impurity A 規格::30mg 保存::-20℃,避光

硝苯地平 英文名稱:Nifedipine 規格::100mg 保存::-20℃,避光

酮洛芬 英文名稱:Tong Luofen 規格::100mg 保存::-20℃,避光

替硝唑 英文名稱:Tinidazole 規格::100mg 保存::-20℃,避光

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