
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
大鼠卵泡膜細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1638
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
大鼠卵泡膜細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、管和神經。哺乳動物的卵巢內卵泡的發育需要相關的調節才能完成,垂體(卵泡刺和黃體**素)使原始卵泡開始發育,其過程中還產生大量的雌。雌是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體的作用下協同合成的,卵泡膜細胞合成的雄透過基膜進入顆粒細胞,并轉變為雌。因此,卵泡膜細胞在生殖***調節中占有關鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性有關的婦產科(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性,參與構成卵母細胞和顆粒細胞發育的微環境且為類固醇的**提供底物。在哺乳動物中調節膜細胞類固醇**的機制已見相關報道,但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細胞經3β-HSD熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
IFN-α1ELISAKit
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析檢測試劑盒
IL-8 ELISA Kit
人白細胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析檢測試劑盒
HumanALCAMELISAKit
磷酸化SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020)
G蛋白結合蛋白RAB38抗體 Anti-RAB38
腫瘤轉移抑制基因H4抗體 Anti-NME4/nm23-H4
軟骨細胞蛋白39抗體 Anti-YKL39/CHI3L2
磷脂酸磷酸酶LPIN2抗體
Lipin 2
Bloom綜合征相關蛋白抗體
BLM
彈性蛋白酶抑制劑抗體 Anti-SKALP/Elafin
抵抗素樣分子α抗體 Anti-RELMa/RELM alpha
利鈉肽受體A抗體 Anti-Natriuretic Peptide Receptor A
鋅指蛋白568抗體 Anti-ZNF568
肌蛋白結合蛋白γ2抗體
SNTG2
糞生素氧化酶CPOX抗體
CPOX
跨膜蛋白SEMA5B抗體 Anti-SEMA5B/Semaphorin 5B
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 Anti-Perilipin A
核苷酸內焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 Anti-ENPP1/PC1/3
腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體 Anti-TNFSF4/CD252
羅丹明標記小鼠IgG(型對照)
大鼠卵泡膜細胞Mouse IgG / RBITC
鋅指蛋白83抗體
Forkhead box protein J1; FOXJ-1; winged helix; FOXJ1; FKHL13; HFH-4; HFH4; MGC35202; forkhead box J1; Forkhead Homologue 4; Forkhead related protein FKHL13; Fox J1; Hepatocyte nuclear factor 3 forkhead homolog 4; HNF-3/forkhead homolog 4; FOXJ1_HUMAN.
大鼠脈絡膜微血管內皮細胞
鴨肝間質細胞
CFPAC-1人胰腺癌細胞
ACHN人腎細胞癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。