
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
大鼠支氣管上皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
支氣管組織
生長特性
貼壁
細胞形態
上皮細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1522
用途
僅供科研實驗
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
大鼠支氣管上皮細胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是,氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子,從而參與氣道炎癥及反應。支氣管上皮細胞在**、慢性阻塞性肺、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道的發病機制中均起著重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎及臨床研究中極為重要。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮細胞采用-中性蛋白酶混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
純化人體RUNX3基因重組表達載體(pCMV5-RUNX3)
體液氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒
人α-內肽(α-EP)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠白介素20(IL-20)elisa分析檢測試劑盒
小鼠突觸融合蛋白2(STX2)elisa檢測試劑盒
磷酸化外紡錘體極樣蛋白1抗體 Anti-phospho-Separase (Ser1073)
Rho相關蛋白激酶1抗體 Anti-ROCK1
核仁蛋白8抗體 Anti-NOL8
鋅指蛋白185抗體 Anti-ZNF185
重組葡萄球菌蛋白A抗體 Protein A
轉化生長因子β1抗體 TGF Beta 1
谷氨酸脫羧酶-65抗體(C端) GAD65
果蠅RhoGAP92B抗體 RhoGAP92B
MDM2樣P53蛋白結合抗體 MDMX
NADH氧化還原酶輔酶4樣蛋白抗體 NDUFA4L2
溶血磷脂?;D移酶抗體 AGPAT1
乳腺癌雌調控蛋白GREB1抗體 GREB1
CD6抗體 CD6
C-肽抗體 C Peptide
磷酸化FMS樣激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr842)
磷酸化沉默調節蛋白1抗體 Phospho-SIRT1 (Ser47)
白介素3受體a(CD123)鏈抗體 IL3RA
胞漿蛋白SH3GL3抗體 SH3GL3
細絲蛋白2抗體 FLNC
心房鈉尿因子/心鈉素/心房利鈉肽/ANP單克隆抗體 Atrial natriuretic factor
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠支氣管上皮細胞組織蛋白提取試劑盒100T
ERK蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
Dimethylaniline monooxygenase [N oxide forming] 3; Dimethylaniline monooxygenase [N-oxide-forming] 3; Dimethylaniline monooxygenase 3; Dimethylaniline oxidase 3; dJ127D3.1; Flavin containing monooxygenase 3; FMO 3; FMO form 2; FMO II; FMO3; FMO3_HUMAN; FMOII; Hepatic flavin containing monooxygenase 3; Hepatic flavin-containing monooxygenase 3; MGC34400; TMAU; Trimethylamine monooxygenase.
大鼠脂肪干細胞
小鼠輸卵管上皮細胞
HS683人腦膠質瘤細胞
C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纖維細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。