
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
人臍靜脈平滑肌細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
臍帶組織
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1495
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人臍靜脈平滑肌細胞分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在中,動脈在胎盤的母體部分出的,與胎盤的子體部胎兒靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管的細胞基礎;血管平滑肌細胞的異常增加的生長潛力在血管發生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍靜脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人臍靜脈平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
通用型HCV亞型(HEPATITIS VIRUS C)病毒定量PCR擴增
KIAA1731蛋白抗體
KIAA1731
趨化因子受體D6抗體
Chemokine Receptor D6
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)elisa檢測試劑盒
半胱氨酸(Cys)含量測試盒
冰凍切片組織IL蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
γ-谷氨酰轉移酶γ-GT測試盒 96T 100管/50樣 微板法
泛素結合酶E2F抗體
NCE2
FOXI2蛋白抗體
FOXI2
四分子交聯體13抗體(四旋蛋白) Anti-TSPAN13/NET-6
原鈣粘附蛋白α2抗體 Anti-PCDHA2
氧化固醇結合蛋白4抗體 Anti-ORP4/OSBP2
泛素連接酶Siah2 Anti-SIAH2
磷酸化Rad51抗體
phospho-RAD51 (Tyr315)
細胞核受體ERBA相關基因2抗體
NR2F6
神經調節肽VGF抗體 Anti-VGF/NERP1
新型核蛋白質1抗體 Anti-NNP1/RRP1 like protein
環指蛋白113A抗體 Anti-RNF113A
轉移生長因子β5抗體 Anti-TGF beta 5/ TGF beta 1
大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)elisa分析檢測試劑盒
人臍靜脈平滑肌細胞hs-CRP ELISA Kit
人甲狀旁腺1-34(PTH 1-34)抗體elisa分析檢測試劑盒
bA3J10.7; CGI 102; Exosome complex component RRP40; Exosome complex exonuclease RRP40; Exosome component 3; hRrp 40; hRrp40; hRrp40p; p10; PCH1B; Ribosomal RNA processing protein 40; Ribosomal RNA-processing protein 40, S. cerevisiae, homolog of; RP11-3J10.8; RRP 40; Rrp40; Rrp40p; EXOS3_HUMAN.
人氣管平滑肌細胞
小鼠臍靜脈內皮細胞
MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X細胞+GFP
CMK-86人急性巨核細胞白血病細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。