
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
小鼠滑膜成纖維細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
滑膜
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1895
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳1-2代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠滑膜成纖維細胞體外培養周期有限;建議使用配套的生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞簡介:
小鼠滑膜成纖維細胞分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構,各種關節內均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構,同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎(OA)以關節軟骨退行性變為特征,其病理改變累及關節的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體,是維持關節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。滑膜細胞主要功能:①滑膜細胞產生潤滑液成分,并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關;②滑膜細胞增生,表現為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞;③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠滑膜成纖維細胞采用混合酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠滑膜成纖維細胞經Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
藥品糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒
NK細胞抑制性受體3DX1抗體
KIR3DX1
轉錄調節蛋白BACH1抗體
BACH1
小鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)elisa檢測試劑盒
大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa檢測試劑盒
組織磷酸二酯酶2(PDE2)活性熒光定量檢測試劑盒
人妊娠相關蛋白A(PAPP-A)elisa檢測試劑盒
NDUF3蛋白抗體
NDUF3
6號染色體開放閱讀框165抗體
C6orf165
5色氨酸羥化酶2抗體 Anti-TPH2
鴨甲型肝炎聚蛋白抗體 Anti-duck hepatitis A virus polyprotein
嗅覺受體家族10亞基J3抗體 Anti-OR10J3
2,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體 Anti-2,4-D(24D1)
磷酸化糖皮質受體DNA結合因子1抗體
phospho-GRLF1 (Tyr1105)
DNA聚合酶α2抗體
DNA polymerase subunit II
上皮型鈣粘附分子抗體 Anti-VE Cadherin
神經激肽A受體/K物質受體抗體 Anti-NK-2R/Neurokinin A Receptor
環指蛋白41抗體 Anti-RNF41
磷酸丙糖異構酶抗體 Anti-Triosephosphate isomerase
大鼠補體蛋白4(C4)elisa分析檢測試劑盒
小鼠滑膜成纖維細胞C4 ELISA Kit
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)elisa分析檢測試劑盒
BABPB2; E4TF1; E4TF1-47; E4TF1-53; E4TF1B; GA binding protein transcription factor, beta subunit 1; GA binding protein transcription factor, beta subunit 2; GABP subunit beta-1; GABP subunit beta-2; GABPB; GABPB-1; GABPB-2; GABPB2; NRF2B1; NRF2B2; Nuclear respiratory factor 2; Transcription factor E4TF1-47; Transcription factor E4TF1-53; GABP2_HUMAN.
小鼠滑膜間充質干細胞
兔食管平滑肌細胞
MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
HTMC人眼小梁網細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。