
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
小鼠腮腺細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
腮腺組織
生長特性
貼壁
細胞形態
梭形、多角形
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1866
用途
僅供科研實驗
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠腮腺細胞分離自腮腺組織;腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的大唾液腺,位于外耳道的前下方,下頜后窩內及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體;唾液腺有3對,腮腺、舌下腺和頜下腺,其中大的一對是腮腺。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞,是一種營養需要復雜、在一般合成培養基中不易生長,體外培養比較困難。目前,DMEM培養液被認為較適于腺細胞的培養。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化。另外,接種的細胞密度也是培養成功的關鍵因素之一,尤其是在腺細胞這種單層細胞培養時,接種的細胞總數量和生長基質表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腮腺細胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯合消化后差速貼壁,結合上皮細胞培養基培養篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腮腺細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
MouseGastrinELISAKit
大鼠凋亡相關因子配體(FASL)elisa分析檢測試劑盒
FASL ELISA Kit
山羊丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒
MDAELISAKit
小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)elisa檢測試劑盒
大鼠前列腺素D2(PGD2)elisa檢測試劑盒
明膠瓊脂平板
兔過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPARβ)elisa檢測試劑盒
γ氨基丁酸(GABA)elisa分析檢測試劑盒
GABA ELISA Kit
人蛋白二硫化物異構酶A3(PDIA3)elisa分析檢測試劑盒
PDIA3ELISAKit
蛋白表位標記技術試劑盒
小鼠草胺膦乙酰轉移酶(PAT)elisa檢測試劑盒
鴿子胃動素(MTL)elisa分析檢測試劑盒
比色法定量檢測試劑盒
MXI1蛋白抗體
MXI1
2號染色體開放閱讀框68抗體
C2orf68
味覺受體蛋白家族2亞基16抗體 Anti-TAS2R16
磷酸化減數分裂重組蛋白家族REC8抗體 Anti-phospho-REC8(Ser251)
核因子κB抑制蛋白α抗體 Anti-NFKBIA/IKB alpha
細胞S期激酶相關蛋白2抗體 Anti-SKP2/skp2 p45
PE標記的兔抗小鼠IgG H&L-Fc
小鼠腮腺細胞Rabbit Anti-Mouse IgG Fc / PE
磷酸核糖焦磷酸合成酶相關蛋白1抗體
HIV1 gp41; HIV-1 gp41; HIV1gp41; HIVgp41; Transmembrane protein gp41; Glycoprotein 41; Human Immunodeficiency Virus 1; HIV1 ENV (gp160); HIV1 gp160; HIV1gp160; HIV-1 gp160; env; Env polyprotein; Envelope glycoprotein gp160; Glycoprotein 41; gp41; HIV1; HIV1 clade a; HIV1/Clade A; SU; Surface protein; Human Immunodeficiency Virus Type 1 TM; Transmembrane protein; ENV_HV1MV.
小鼠三叉神經星形膠質細胞
兔臍帶血間充質干細胞
TM4正常小鼠睪丸Sertoli細胞
JF-305人胰腺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。