
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人CIK細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
外周血。
生長特性
懸浮培養(yǎng)
細胞形態(tài)
上皮樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1458
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 細胞來源于外周血。
2) 細胞鑒定:CD3或者CD56熒光染色為陽性。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
4) 細胞生長方式:懸浮培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代 CIK 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
CIK細胞,即細胞因子誘導的殺傷細胞,由于該細胞同時表達CD3+和CD56+兩種跨膜蛋白,又稱為NK細胞樣T細胞,具有T細胞的抗瘤活性和NK細胞的非MHC限制性殺瘤特點。
CIK細胞對腫瘤細胞的識別能力強,能點射腫瘤細胞,且不會傷及正常細胞。尤其對手術(shù)后或放化療后患者效果顯著,能消除殘留微小的轉(zhuǎn)移病灶,防止癌細胞擴散,提高機體力。CIK細胞被認為是新一代的腫瘤過繼細胞的方案之一。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物甘露糖6-磷酸異構(gòu)酶(mannose-6-phosphate isomerase;MPI)電泳分析試劑盒
組織L-乳酸比色法定量檢測試劑盒
人3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠B-細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa檢測試劑盒
小鼠密封蛋白(OCLN)elisa檢測試劑盒
肝素(heperin)纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒
核黃素轉(zhuǎn)運因子2(RFT2)elisa檢測試劑盒
磷酸二酯酶5A(Phosphodiesterase 5A)
小鼠彈性蛋白酶4(ELA4)elisa檢測試劑盒
尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶單克隆抗體 UGDH
葡萄糖6-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體 GNPNAT1
GR6蛋白抗體 GR6
G蛋白偶聯(lián)受體179抗體 GPR179
乙酰化和磷酸化組蛋白H3抗體 Histone H3 (acetyl K9, phospho S10)
應激誘導分泌蛋白1抗體 SISP1
二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白3抗體 CRMP3
芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4抗體 AADACL4
外周蛋白單克隆抗體 Peripherin
無精癥缺失基因2抗體 DAZ2
Sema6A抗體 Sema6A
SUSD1蛋白抗體 SUSD1
ADP核糖磷酸水解酶9抗體 NUDT9
AF680標記的血小板內(nèi)皮細胞黏附分子1抗體 CD31, Alexa Fluor 680 conjugated
膠體金標記的β淀粉樣肽(1-42)單克隆抗體 beta-Amyloid(1-42), Co-Gold conjugated
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白117抗體 CCDC117
小鼠穿孔素1(PRF1)elisa檢測試劑盒
人CIK細胞小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)elisa分析檢測試劑盒
人CD22分子(CD22)elisa檢測試劑盒
alpha 2C Adrenergic Receptor; Adra 2c; Adra 2c; ADRA2C; ADRA2L2; ADRA2L2; ADRA2RL2; ADRA2RL2; ADRARL2; ADRARL2; Adrenergic alpha 2C receptor; Adrenoceptor alpha 2C; Alpha 2C adrenergic receptor; Alpha 2C adrenergic receptor subtype C4; Alpha 2C adrenoceptor; Alpha 2C adrenoreceptor; Alpha 2CAR; alpha2 AR C4; alpha2 AR C4; alpha2 C4; alpha2 C4; alpha2C; alpha2C; ALPHA2CAR; alpha2cii-adrenergic receptor; Subtype alpha2 C4; Subtype alpha2 C4; ADA2C_HUMAN.
人CIK細胞
人小膠質(zhì)細胞
HRMC(腎小球系膜細胞)
MRC-5人胚肺成纖維細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。