
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
豬頸動脈平滑肌細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
頸動脈組織
生長特性
貼壁培養
細胞形態
長梭形細胞
分類
豬原代細胞
貨號
A01X2258
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常頸動脈組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。
推薦培養基
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細胞培養體系 作為體外培養的培養基。
細胞簡介:
頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內動脈,前者分布至頭頂部和顏面部,后者進入顱內分布至腦和眼眶內。血管發生一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。因此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養和研究可用來發現和確定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的產品:
載玻片細胞CASPASE-10蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
活性氧檢測試劑盒DCFHDA200T
大鼠球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒
酵母5-羥色胺-N-乙酰基轉移酶(Serotonin N-Acetyltransferase)活性
土壤β-葡萄糖苷酶(β - GC)測試盒
鈣結合線粒體載體蛋白抗體 Anti-SLC25A12/ARALAR
受體相互作用蛋白激酶1抗體 Anti-RIP1/RalBP1
細胞核因子/k基因結合核因子 p52/p100抗體 Anti-NFKB p52
鋅指蛋白ZBTB34抗體 Anti-ZBTB34
纖維母細胞生長因子3抗體 FGF3
線粒體內膜轉位源蛋白9抗體 TIMM9
γ干擾素誘導蛋白16抗體 IFI16
白介素17受體D抗體 IL-17RD
BRD2蛋白重組兔單克隆抗體 BRD2
CD39樣蛋白2/ENTPD6抗體 ENTPD7
離子型谷氨酸受體1重組兔單克隆抗體 NMDAR1
磷酸化CREB-1抗體 phospho-CREB-1 (Ser133)
腫瘤壞死因子受體相關因子7抗體 TRAF7
軸突蛋白2抗體 NRXN2
睪丸特異激酶底物蛋白抗體 TSKS
骨形態發生蛋白3抗體 BMP3
L-絲氨酸脫氨酶抗體 SDSL
MS4A18蛋白抗體 MS4A18
人瘤病毒16型L2抗體 HPV16 L2
/通透性增加蛋白樣3抗體 BPIL3
人別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)elisa檢測試劑盒
豬頸動脈平滑肌細胞小鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa檢測試劑盒
人Rho家族GTP酶1(RND1)elisa檢測試劑盒
2010013H22Rik; 2210021I22Rik; 2210401J11Rik; 3-galactosyl-O-glycosyl-glycoprotein beta-1; 6-N-acetylglucosaminyltransferase 3; 6-N-acetylglucosaminyltransferase; Beta 1 3 galactosyl O glycosyl glycoprotein beta 1 6 N acetylglucosaminyltransferase 3; Beta-1; Beta1 6 N acetylglucosaminyltransferase 3; beta1 6 N acetylglucosaminyltransferase; C2/4GnT; C24GNT; C2GnT M; C2GnT mucin type; C2GnT-M; C2GnT-mucin type; C2GnT2; C2GNTM; Core 2 beta 1 6 N acetylglucosaminyltransferase II; Core 2/core 4 beta 1 6 N acetylglucosaminyltransferase; Core 2/core 4 beta-1; dI/C2/C4GnT; EC 2.4.1.102; EC 2.4.1.150; GCNT3; GCNT3_HUMAN; Glucosaminyl (N acetyl) transferase 3; Glucosaminyl (N acetyl) transferase 3 mucin type; GnT M; GNTM; hC2GnT M; hC2GnT-M; Mucus-type core 2 beta-1,6-N-acetylglucosaminyltransferase. OTTHUMP00000163601.
豬頸動脈平滑肌細胞
大鼠肝kupffer細胞
NCI-H1417 [H1417]人小細胞肺癌細胞
人脂肪肉瘤細胞;SW872(ATCC HTB-92)
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。