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定性檢測目的蛋白時細胞樣品的處理方法
日期：2025-06-21 02:28
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摘要：定性檢測目的蛋白時細胞樣品的處理方法
原始樣品可為細胞、組織、培養上清、免yi 沉淀或親和純化的蛋白，以下為定性檢測目的蛋白時細胞樣品的處理方法，其余的樣品制備方法參閱相關文獻。
1．培養細胞或藥wu 處理。
2．棄培養基，用1X PBS漂洗細胞2次，去盡殘留培養基。
3．加入1X SDS樣品緩沖液(6-well plate, 100 μl /w或
4．超聲 10~15秒剪切DNA以減低樣品粘性。
5．煮沸樣品5 minutes。
6．離心
7．電泳分離：上樣15μl~20 μl 至 SDS-PAGE 膠 (
如要定量檢測某蛋白的表達水平，應用RIPA裂解液(1 ml per 107 cells/
注意：一般上樣20~30 μg已足夠，如待檢蛋白為低豐度蛋白，可加大上樣量至100μg，但電泳條帶易拖尾，可制備亞細胞組份或采用更敏感的檢測方法。