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ELISA顯色操作分析
日期：2025-06-20 00:21
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摘要：ELISA顯色操作分析
大多數情況下ELISA商品多選用HRP 和堿性磷酸酶（ALP）。HRP可催化的底物為過氧化氫，參加反應的顯色供氫體有鄰苯二胺（OPD）、鄰聯甲苯胺（OT）及四甲基聯苯胺（TMB）等。其中OPD 難溶于水，見光易變質，使用前配制，反應過程須避光且OPD有一定毒性。TMB 的反應產物為藍色，目視對比鮮明，其性質穩定，對人體無毒。若選用各類酸性終止液，則會使藍色轉變為黃色。TMB作底物時的產物檢測波長為450 nm ，ALP 作為標記物，其底物一般采用對硝基苯磷酸酯（pNPP），產物為黃色的對硝基酚，吸收波長是405 nm。為了保證結果的穩定性，必須要嚴格按照試劑盒說明書中規定的溫度和時間操作，不可隨意改變溫度和時間。