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免 疫熒光(IF)樣本準備要求
日期:2025-06-21 00:53
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摘要:
免 疫熒光(immunofluorescence,IF),通常是指用熒光標記的抗體示蹤或檢查樣品中相應抗原的方法。根據抗原抗體反應,將不影響抗原抗體相互作用的熒光分子標記在抗體上,與其相應的抗原反應后,在熒光顯微鏡下針對熒光標記分子的激發光發射光進行觀察,從而檢測目的指標的相對含量、在組織細胞中的定位。
樣本準備要求:
1、取材手法:要求取材器械鋒利,盡可能選擇薄的手術刀片,減少剪刀的使用,避免擠壓挫傷標本。較準確地取到目的部位組織,夾取標本的時候盡量遠離目的區域組織。
2、取材速度:盡量...
免 疫熒光(immunofluorescence,IF),通常是指用熒光標記的抗體示蹤或檢查樣品中相應抗原的方法。根據抗原抗體反應,將不影響抗原抗體相互作用的熒光分子標記在抗體上,與其相應的抗原反應后,在熒光顯微鏡下針對熒光標記分子的激發光發射光進行觀察,從而檢測目的指標的相對含量、在組織細胞中的定位。
樣本準備要求:
1、取材手法:要求取材器械鋒利,盡可能選擇薄的手術刀片,減少剪刀的使用,避免擠壓挫傷標本。較準確地取到目的部位組織,夾取標本的時候盡量遠離目的區域組織。
2、取材速度:盡量保證樣本離體后5min內放入到合適的固定液內。如果一只動物同時取多種器官,優先取消化器官,其次取中 樞神經系統器官(腦,脊髓等),皮膚、肌肉等可放到后取。
3、組織塊大小:未經灌注的標本組織厚度不要超過1cm。
4、固定液:針對不同的標本特點及實驗目的一定要選用正確的固定液。
5、固定液量:固定液體積為組織的10倍,且組織能在容器內自由移動,不貼壁不沉底,并做好清晰標記。
6、固定溫度:常溫即可,無需冷藏,切勿冷凍結冰,否則固定液結冰形成冰晶嚴重破壞組織形態結構。