產品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數規格：
產品名稱：埃可病毒 11 型PCR檢測試劑盒
產品規格：50T
產品貨號：FS-P63392
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
氧氟沙星 Ofloxacin 82419-36-1 質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養
西紅花苷II（標準品） Crocin II 55750-84-0 質量規格：HPLC≥98%，標準品
(S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿 (s)-10-hydroxycamptothecin 19685-09-7 質量規格：>98%,BR
組織腎素（renin）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次
細胞D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次
棉隆(標準品) Dazomet 533-74-4 質量規格：分析標準品,97%
咖啡甘素（dulcin）含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次
細胞FSH-BETA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/20次
體液谷胱甘肽（GLUTATHIONE）總濃度熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：50次
核糖核酸酶 A 溶液 RNase A Solution 9001-99-4 質量規格：分子生物學級,>60 U/mg,10 mg/ml
2,3',4,4'-四羥基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T)) 2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone 61445-50-9 質量規格：>90.0%(GC)(T)
動物源性食品火雞源基因檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次
4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC)) 4-tert-Butylthiacalix[4]arene 182496-55-5 質量規格：>98.0%(HPLC)
DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑 DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole] 664985-43-7 質量規格：用于蛋白質組分析，用于高效液相色譜標記，熒光染料，用于質譜的衍生化試劑
溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）溶液（100毫摩爾） 進口/國產 規格：1毫升
銀椴苷；椴樹苷（標準品） Tiliroside 20316-62-5 質量規格：HPLC≥98%，標準品
埃可病毒 11 型PCR檢測試劑盒血液增培養基 250(g)
乳糖膽鹽培養基 1000(g)
Honda氏產毒肉湯基礎 250(g)
緩沖MUG瓊脂 (BMA) 100(g)
炭疽桿診斷抗原 1ml炭疽桿檢測用配套試劑
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 (CM0075) Oxoid
Agar 瓊脂粉 Japan1kg
緩沖MUG瓊脂 (BMA) 100(g)
Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT 沙門氏富集肉湯 1.10236.0500MERCK默克
水楊素 1g進口分裝，與HB116配套使用