實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

產品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數規格：
產品名稱：非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒
產品規格：50T
產品貨號：FS-P63672
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）

 石蠟切片組織PAR-2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規格：10/20次

細胞衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅（ZIEHL-NEELSEN）原位染色試劑盒 進口/國產 規格：50次

(R)-美托洛爾 (R)-Metoprolol 81024-43-3 質量規格：美國進口

N-氧基曲唑酮 Trazodone N-Oxide 55290-68-1 質量規格：美國進口

二苯胺（DPA）DNA比色法定量測定試劑盒 進口/國產 規格：10次

2,2'-二辛可寧酸(>98.0%(HPLC)) 2,2'-Bicinchoninic Acid 1245-13-2 質量規格：>98.0%(HPLC)

鹽酸丙卡巴肼(標準品) Procarbazine HCl 366-70-1 質量規格：HPLC>98%,標準品

促腎上腺皮質(1-24), 人 ACTH (1-24), human 16960-16-0 質量規格：>95%,BR

頭孢噻肟鈉(標準品) Cefotaxime Sodium 64485-93-4 質量規格：效價測定

體液單胺氧化酶（MAO）總活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑 Fenticonazole Nitrate 73151-29-8 質量規格：>99%,BR

創傷弧（Vibrio vulnificus）鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

6-FAM, SE;6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester 92557-81-8 質量規格：0.9

酞菁二鋰(>93.0%(N)) Dilithium Phthalocyanine 25510-41-2 質量規格：>93.0%(N)

TUBULIN蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：25次

精喹禾靈(分析標準品，98%) Quizalofop-p-ethyl 100646-51-3 質量規格：分析標準品，98%

非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒Preston肉湯基礎 英文名稱：Preston Broth Base 產品規格：250g 產品用途：用于空腸彎曲桿的選擇性增用途:用于空腸彎曲桿選擇性增培養。成分(g/L)牛肉浸粉 10.0蛋白胨 10.0氯鈉 5.0酸鈉 0.25焦鈉 0.25硫酸亞鐵 0.25pH值7.0± 0.2 25℃用法稱取本品 25.75g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,每瓶 200ml,121℃高壓滅 15 分鐘,冷至 50℃左右時,每瓶加入一支 Preston肉湯添加劑和 10ml 無裂解馬血,混勻,分裝試管,備用。注：本培養基高壓滅后有沉淀物。

布氏肉湯添加劑 英文名稱：Brucella Broth Additive 產品規格：2ml*5 產品用途：每支加入225ml布氏肉湯中產品用法：每支加入225ml布氏肉湯中

波爾頓選擇性肉湯 英文名稱：Bolton Broth 產品規格：250g 產品用途：用于空腸彎曲選擇性增培養用途:用于空腸彎曲選擇性增培養成分(g/L)動物組織酶解物 10.0乳白蛋白水解物 5.0酵母浸粉 5.0氯鈉 5.0α-酮戊二酸 1.0酸鈉 0.5偏氫鈉 0.5碳酸鈉 0.6氯血紅素 0.01pH值7.4 ± 0.2 25℃用法稱取本品 27.6g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,每瓶 225ml ,121℃高壓滅 15 分鐘,冷至 45 -50℃時 ,每瓶培養基中加入 12.25ml 無裂解脫纖維羊或馬血和 1支 Bolton 肉湯添加劑,混勻,備用。注：培養基高壓滅后有一些小黑色顆粒。

甘露醇卵黃多粘素瓊脂基礎（MYP） 英文名稱：Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 產品規格：250g 產品用途：用于蠟樣芽孢桿的固體平板計數（GB.SN標準)用途:用于蠟樣芽孢桿的固體平板計數成分(g/L)蛋白胨 10.0甘露醇 10.0牛肉粉 1.0氯鈉 10.0酚紅 0.025瓊脂 15.0pH值7.2 ± 0.1 25℃用法稱取本品 46.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝每瓶 100ml,經 121℃高壓滅 15 分鐘,待培養基冷卻至 50℃時,每瓶加入 50% 卵黃乳液 5ml 及多粘素B 10000IU,搖勻,傾入無平皿。

胰酪胨大豆多粘素肉湯基礎 英文名稱：Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 產品規格：250g 產品用途：用于蠟樣芽孢桿的MPN值測定產品用途：用于蠟樣芽孢桿的MPN值測定 (SN標準)產品用法：稱取本品3.0克，加熱溶解于100ml蒸餾水中，煮沸2分鐘，121℃高壓滅15分鐘，冷至50℃左右時，加入1支多粘素B（ 2.25萬單位），混勻，無分裝于滅試管，備用。質量控制與典型特征：接種10-100個蠟樣芽孢桿，30℃培養48小時應生長良好，溶液混濁。

改良V-P培養基 英文名稱：V-P Medium,Modified 產品規格：250g 產品用途：用于蠟樣芽孢桿的V-P試驗用途用于蠟樣芽孢桿的V-P試驗。成分（g/L）胰蛋白胨 7.0g葡萄糖 5.0g氯鈉 5.0gPH值　6.5±0.1用 法稱取本品17克，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管，每管5ml，121℃高壓滅10分鐘備用。質量控制和典型特征蠟樣芽孢桿在35℃培養48小時，加入V-P試劑及肌酸數滴，靜止1小時，溶液變為伊紅色，為陽性反應。

胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎 英文名稱：Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 產品規格：250g 產品用途：用于蠟樣芽孢桿的溶血測試驗用途用于蠟樣芽孢桿的溶血測試驗。成分（g/L）胰酪胨 15.0g大豆胨 5.0g氯鈉 5.0g瓊脂　15.0gPH值 6.8-7.2用 法稱取本品4.0克，加熱攪拌溶解于100ml蒸餾水中，分裝燒瓶，每瓶100ml，121℃高壓滅15分鐘，冷至45－50℃時加入5ml無脫纖維羊血，混勻后傾注平板，每平皿18-20ml.質量控制和典型特征在30-32℃培養18-24小時，蠟樣芽孢桿典型特征為在落周圍呈現β型完全溶血的溶血環。

酪蛋白瓊脂 英文名稱：Casein Agar 產品規格：250g 產品用途：用于蠟樣芽孢桿的酪蛋白分解試驗用途:用于蠟樣芽孢桿的酪蛋白分解試驗。成分(g/L)酪蛋白 10.0牛肉浸粉 3.0氯鈉 5.0磷酸氫二鉀 2.0瓊脂 15.0溴百里香酚蘭 0.05pH值7.4 ± 0.1 25℃用法稱取本品 35.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 20 分鐘,備用。注：酪蛋白不溶解,本培養基有沉淀物。