
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
服務:所有的檢測試劑盒均免費代測,您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可!本地也可以上門收取樣本!全程檢測試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗。本公司產品僅用于科研實驗。老客戶可享受優惠折扣服務!
產品名稱 |
裂解型糖基化終末產物受體試劑盒 |
貨號 |
96T/48T |
貨號 |
FS-016290 |
產品名稱:裂解型糖基化終末產物受體試劑盒
貨號:FS-016290
規格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照國家標準進行生產,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的生產批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準
ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit人細胞間粘附分子1 96T
BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit人腦源性神經營養因子 96T
ENK(Human enkephalin) ELISA Kit人腦啡肽 96T
DKK1(Human Dickkopf 1) ELISA Kit人Dickkopf 1 96T
F II ELISA Kit大鼠凝血因子Ⅱ 96T
CgA(Human Chromogranin) ELISA Kit人嗜鉻蛋白A 96T
SHBG(Mouse sex hormone-binding globulin) ELISA Kit小鼠性結合球蛋白 96T
CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit人癌胚抗原 96T
HPA(Human Heparanase) ELISA kit人乙酰肝素酶 96T
Beta-CG ELISA Kit大鼠絨毛膜促性β 96T
RANKL ELISA Kit大鼠核因子κB受體活化因子配基 96T
sP-selectin ELISA Kit大鼠可溶性P選擇素 96T
裂解型糖基化終末產物受體試劑盒通用試劑 3,4-二甲基苯乙酮 3',4'-Dimethylacetophenone,98% 634430 5G
通用試劑 3,4-二甲基二苯甲酮 3,4-Dimethylbenzophenone,99% 2571-39-3 25G
通用試劑 2-羥基-4-甲氧基二... 2-Hydroxy-4-methoxybenzophenone,98% 131-57-7 25G
通用試劑 2-羥基-5-甲氧基苯... 2'-Hydroxy-5'-methoxyacetophenone,99% 705-15-7 5G
通用試劑 4-甲苯磺酰丙酮 1-(p-tolylsulfonyl)-2-propanone,98.0% 5366-49-4 5G
通用試劑 去氫表雄酮 trans-Dehydroandrosterone,≥99% 53-43-0 1G
通用試劑 二芐基甲酮 1,3-Diphenyl-2-propanone,≥98.0% 102-04-5 5G
通用試劑 4-甲氧基-3-丁烯-2-酮 4-Methoxy-3-buten-2-one 4652-27-1 10G
通用試劑 2,4'-二氟二苯甲酮 2,4'-Difluorobenzophenone,96% 342-25-6 5G
通用試劑 2-萘基溴甲基酮 1,3-Diphenyl-2-propanone,99% 613-54-7 5G
通用試劑 2,4-二氟二苯甲酮 2,4-Difluorobenzophenone,98% 85068-35-5 5G
通用試劑 2,6-二氟二苯甲酮 2,6-Difluorobenzophenone,≥98.0% 59189-51-4 5G