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產品名稱 |
規格 |
貨號 |
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兔肺微血管周細胞 |
詳見說明書 |
FS-016468 |
細胞培養操作規程：
主要功能：
（1）血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管的進展和穩定有關。
生理變化：
（1）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin熒光染色。
（3）原代細胞培養末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
培養步驟：
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
pDsRed2-Nuc（pDsRed2Nuc）（60908-2500） PC-12 [PC12](低分化)細胞株
小鼠胰島素(INS)ELISA Kit pJFCAT1
小RNA克隆試劑盒 植物維生素K1(VK1)ELISA Kit
pSF-pA-MinProm-FLuc 侵襲大腸桿PCR檢測試劑盒
Formalin Solution in Phosphate Buffer,10% YIp353
雞促黃體(LH)ELISA Kit IRF7-luci（IRF7luci）
Rhodobacter adriaticus medium 人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA Kit
pDsRed-Express2-1（pDsRedExpress21） AGS（GFP）細胞株
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA Kit phKikGR1-S1（phKikGR1S1）
脈沖電泳Marker(低范圍PFG)（見關聯產品）（停產） 阿拉伯樹膠粉
ppi25.7 可逆銅染試劑盒
Retterer煌染色法肌肉組織染色試劑盒 pUN25
大鼠乙酰膽堿受體抗體(ACHRab)ELISA Kit Sodium Phosphate Buffer（磷酸鈉緩沖液）,0.5M,pH8.0
兔肺微血管周細胞氫化的松琥珀酸鈉 英文名稱：Hydrocortisone sodium succinate 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
卡巴膽堿 英文名稱：Kaba choline 規格：：30mg 保存：：-20℃，避光
帕羅西汀 英文名稱：Pa Rossi Dean hydrochloride 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
尼可占替諾（煙酸占替諾） 英文名稱：Xantinol nicotinate (xanthinol nicotinate) 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
奧沙普秦 英文名稱：O Schaap Qen 規格：：50mg 保存：：-20℃，避光
卡莫氟 英文名稱：Kamo 規格：：50mg 保存：：-20℃，避光
枸櫞酸鋅 英文名稱：Zinc citrate 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
蘿巴新 英文名稱：Raubasine 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
二甲磺酸阿米三嗪 英文名稱：Two Amie three mesylate hydrochlorothiazide 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
7-甲氧基-4'-羥基異黃酮 英文名稱：7- methoxy -4'- hydroxy isoflavone 規格：：20mg 保存：：-20℃，避光
黃豆甙元 英文名稱：Daidzein 規格：：100mg 保存：：-20℃，避光
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過*易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。