
培養步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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產品名稱 |
規格 |
貨號 |
小鼠卵巢上皮癌細胞 |
1×106 |
FS-X019664 |
產品名稱:小鼠卵巢上皮癌細胞
產品英文:ID8
貨號:BH-X019664
細胞培養條件:DMEM+10%FBS+1%P/S
生長狀態:貼壁生長
產品規格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
細胞培養操作規程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)與血管的進展和穩定有關。
生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。
(3)原代細胞培養末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數:>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
鼠抗人CD4單克隆抗體 Anti-CD4 0.2ml
抗CD40L抗體 anti-CD40L 0.1ml
CD44抗體 Anti-CD44 0.1ml
CD45抗體 Anti-CD45 0.1ml
CD49抗體 Anti-CD49/VLA 0.1ml
CD5抗體 Anti-CD5 0.1ml
間粘附分子-1抗體 Anti-CD54/ICAM-1 0.1ml
小鼠卵巢上皮癌細胞CD44變體6(CD44-v6)elisa檢測試劑盒英文名稱:CD44-v6 ELISA Kit,英文縮寫:CD44-v6,產品別名:CD44變體6(CD44-v6)ELISA檢測試劑盒,CD44變體6(CD44-v6)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)elisa檢測試劑盒英文名稱:ⅠCTP ELISA Kit,英文縮寫:ⅠCTP,產品別名:Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA檢測試劑盒,Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒英文名稱:BAX ELISA Kit,英文縮寫:BAX,產品別名:Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA檢測試劑盒,Bcl-2相關X蛋白(BAX)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)elisa檢測試劑盒英文名稱:S1P1 ELISA Kit,英文縮寫:S1P1,產品別名:1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)ELISA檢測試劑盒,1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
糖蛋白130(gp130/CD130)elisa檢測試劑盒英文名稱:gp130/CD130 ELISA Kit,英文縮寫:gp130/CD130,產品別名:糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA檢測試劑盒,糖蛋白130(gp130/CD130)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
表皮生長因子受體2(Her2)elisa檢測試劑盒英文名稱:Her2 ELISA Kit,英文縮寫:Her2,產品別名:表皮生長因子受體2(Her2)ELISA檢測試劑盒,表皮生長因子受體2(Her2)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
CD80分子(CD80/B7-1)elisa檢測試劑盒英文名稱:CD80/B7-1 ELISA Kit,英文縮寫:CD80/B7-1,產品別名:CD80分子(CD80/B7-1)ELISA檢測試劑盒,CD80分子(CD80/B7-1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
組氨酸豐富鈣結合蛋白(HRC)elisa檢測試劑盒英文名稱:HRC ELISA Kit,英文縮寫:HRC,產品別名:組氨酸豐富鈣結合蛋白(HRC)ELISA檢測試劑盒,組氨酸豐富鈣結合蛋白(HRC)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
轉化生長因子α(TGFα)elisa檢測試劑盒英文名稱:TGFα ELISA Kit,英文縮寫:TGFα,產品別名:轉化生長因子α(TGFα)ELISA檢測試劑盒,轉化生長因子α(TGFα)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
中性粒明膠酶關聯脂質運載蛋白(NGAL)elisa檢測試劑盒英文名稱:NGAL ELISA Kit,英文縮寫:NGAL,產品別名:中性粒明膠酶關聯脂質運載蛋白(NGAL)ELISA檢測試劑盒,中性粒明膠酶關聯脂質運載蛋白(NGAL)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
脂肪酶I(LIPI)elisa檢測試劑盒英文名稱:LIPI ELISA Kit,英文縮寫:LIPI,產品別名:脂肪酶I(LIPI)ELISA檢測試劑盒,脂肪酶I(LIPI)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。