
培養步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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產品名稱 |
規格 |
貨號 |
正常小鼠睪丸Sertoli細胞 |
1×106 |
FS-X019699 |
產品名稱:正常小鼠睪丸Sertoli細胞
產品英文:TM4
貨號:BH-X019699
細胞培養條件:DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S
生長狀態:貼壁生長
產品規格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
細胞培養操作規程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)與血管的進展和穩定有關。
生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。
(3)原代細胞培養末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數:>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
下游轉錄因子Gli1蛋白抗體 Anti-GLI1 0.2ml
胰高血糖素樣肽-1抗體 Anti-GLP-1 0.1ml
胰高血糖素樣肽-2抗體 Anti-GLP-2 0.2ml
葡萄糖轉運蛋白1抗體 Anti-GLUT1 0.1ml
葡萄糖轉運蛋白2抗體 Anti-GLUT2 0.1ml
葡萄糖轉運蛋白3抗體 Anti-GLUT3 0.2ml
葡萄糖轉運蛋白4抗體 Anti-GLUT4 0.1ml
正常小鼠睪丸Sertoli細胞跨膜蛋白1(TMEM1)elisa檢測試劑盒英文名稱:TMEM1 ELISA Kit,英文縮寫:TMEM1,產品別名:跨膜蛋白1(TMEM1)ELISA檢測試劑盒,跨膜蛋白1(TMEM1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
景天庚酮糖激酶(SHPK)elisa檢測試劑盒英文名稱:SHPK ELISA Kit,英文縮寫:SHPK,產品別名:景天庚酮糖激酶(SHPK)ELISA檢測試劑盒,景天庚酮糖激酶(SHPK)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
人抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)elisa檢測試劑盒英文名稱:Anti-RNP ELISA Kit,英文縮寫:Anti-RNP,產品別名:人抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)ELISA檢測試劑盒,人抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)elisa檢測試劑盒英文名稱:ADAM10 ELISA Kit,英文縮寫:ADAM10,產品別名:解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA檢測試劑盒,解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
角蛋白10(KRT10)elisa檢測試劑盒英文名稱:KRT10 ELISA Kit,英文縮寫:KRT10,產品別名:角蛋白10(KRT10)ELISA檢測試劑盒,角蛋白10(KRT10)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
甲狀腺素受體α(THRα)elisa檢測試劑盒英文名稱:THRα ELISA Kit,英文縮寫:THRα,產品別名:甲狀腺素受體α(THRα)ELISA檢測試劑盒,甲狀腺素受體α(THRα)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
激肽釋放酶14(KLK14)elisa檢測試劑盒英文名稱:KLK14 ELISA Kit,英文縮寫:KLK14,產品別名:激肽釋放酶14(KLK14)ELISA檢測試劑盒,激肽釋放酶14(KLK14)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
基質金屬蛋白酶1(MMP1)elisa檢測試劑盒英文名稱:MMP1 ELISA Kit,英文縮寫:MMP1,產品別名:基質金屬蛋白酶1(MMP1)ELISA檢測試劑盒,基質金屬蛋白酶1(MMP1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
肌球蛋白輕鏈1(MYL1)elisa檢測試劑盒英文名稱:MYL1 ELISA Kit,英文縮寫:MYL1,產品別名:肌球蛋白輕鏈1(MYL1)ELISA檢測試劑盒,肌球蛋白輕鏈1(MYL1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
肌鈣蛋白T(TNT)elisa檢測試劑盒英文名稱:TNT ELISA Kit,英文縮寫:TNT,產品別名:肌鈣蛋白T(TNT)ELISA檢測試劑盒,肌鈣蛋白T(TNT)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
互生蛋白γ1(SNTγ1)elisa檢測試劑盒英文名稱:SNTγ1 ELISA Kit,英文縮寫:SNTγ1,產品別名:互生蛋白γ1(SNTγ1)ELISA檢測試劑盒,互生蛋白γ1(SNTγ1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。