細胞培養操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養，補加培養基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產品名稱	GL-261小鼠膠質細胞瘤	英文名稱	GL-261:GL261
產品貨號	A01X1052	培養條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細胞形態	成纖維細胞樣
產品種屬	小鼠	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	膠質瘤	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞別稱：GL-261；小鼠膠質瘤細胞

種屬來源：小鼠

年齡性別：

組織來源：膠質瘤

生長特性：貼壁生長

細胞形態：成纖維細胞樣

背景簡介：1939年3-甲基膽蒽顱內注射誘導Gl261腫瘤，經C57BL/6小鼠體內培養，經同基因小鼠株連續移植維持，于1990年代中期建立體外生長細胞培養;文獻中描述了攜帶TP53和KRAS突變的細胞

生物等級：1

細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達情況：

保藏機構：

培養基：90% DMEM+10% FBS+雙抗

培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

9號染色體開放閱讀框152抗體       C9orf152

腫瘤壞死因子受體超家族成員27抗體  Anti-EDA2R       磷酸化蛋白酶活化受體4抗體  Anti-Phospho-PAR4 (Thr163)

丙型肝炎病毒NS5A反式蛋白13抗體       NOLC1

磷酸化間變型瘤激酶抗體       phospho-ALK (Tyr1586)

P53應答基因蛋白5抗體  Anti-WFDC5       痛覺調節肽NPFF抗體  Anti-NPFF/FMRFamide

半胱天冬酶-3酶原抗體  Anti-pro-caspase-3       突觸結合蛋白10抗體  Anti-Synaptotagmin X

DPY19L3蛋白抗體      DPY19L3

環指蛋白190抗體  Anti-RNF190       突觸結合蛋白4抗體  Anti-Synaptotagmin-4人核因子κB(NF-κB)elisa分析檢測試劑盒       HumanNF-κBELISAKit

組織蛋白酶H輕連抗體       Cathepsin H light chain

大鼠β防御素2(DEFB2)elisa分析檢測試劑盒       DEFB2 ELISA kit

魚透明質酸(HA)elisa檢測試劑盒       大鼠谷胱甘肽S轉移酶θ1(GSTθ1)elisa檢測試劑盒

細胞基質金屬（MMP-9）活性熒光定量檢測試劑盒       人脯氨酸肽酶(PEPD)elisa檢測試劑盒

LIM源框蛋白1抗體       LIM1

GL-261小鼠膠質細胞瘤促凋亡Bik蛋白抗體       Bik

原鈣粘蛋白γA12抗體       PCDHGA12

細胞傳代培養操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。
（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。