細胞培養操作：
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養，補加培養基至6ml。24-48h后換液。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性：
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產品名稱 |
英文名稱 |
NIT-1 |
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產品貨號 |
AXB7137 |
培養條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
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生長特性 |
貼壁細胞 |
細胞形態 |
上皮細胞樣 |
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產品種屬 |
小鼠 |
凍存條件 |
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
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組織來源 |
胰腺/朗格漢斯胰島 |
用途 |
僅供科研研究實驗 |
商品詳情：
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
生長培養基 Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:3
推薦換液頻率 2~3次/周
年齡（性別） 10周齡
組織來源 胰腺/朗格漢斯胰島
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 胰腺癌細胞
生物等級 2
保藏機構 ATCC; CRL-2055
R Cadherin 轉錄調節因子C/EBPδ抗體
Ran結合蛋白11抗體 IPO11
載玻片細胞BAD蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 R Cadherin/CDH4
細胞乙醇比色法定量檢測試劑盒 小鼠D-多巴色素變位酶(DDT)elisa檢測試劑盒
泛素蛋白連接酶U抗體 Anti-UBE2U 組蛋白精氨酸甲基轉移酶5抗體 Anti-PRMT5
β淀粉樣前體蛋白結合蛋白2抗體 APBA2
大鼠血管內皮生長因子B(VEGFB)elisa檢測試劑盒 CEBP Delta
磷酸化磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗體 Anti-phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 固醇調節元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體 Anti-SCAP/SREBF chaperone proteinZCWPW2蛋白抗體 ZCWPW2
超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒 小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa檢測試劑盒
Cy5.5標記的驢抗人IgG H&L Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy5.5
牛血清白蛋白(ALB)elisa生化檢測試劑盒 ALB ELISA kit
小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)elisa生化檢測試劑盒 GAD-Ab-IgGELISAKit
倉鼠核因子κB(NF-κB)elisa生化檢測試劑盒 NF-κB Elisa Kit
NIT-1小鼠胰島素瘤β細胞人調寧蛋白-1(CNN1)elisa生化檢測試劑盒 CNN1ELISAKit
細胞總乳酸比色法定量檢測試劑盒 蔗糖酶測試盒
細胞傳代培養操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。
（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。