
本網站銷售的所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業或科研等非醫療目的。
商品屬性:
產品貨號 |
AXB10682 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
產品分類 |
人細胞系 |
產品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態 |
上皮細胞樣 |
英文名稱 |
HEK293-EGFP-PURO |
組織來源 |
胚胎腎 |
商品介紹:
細胞別稱;HEK293-EGFP-PURO;人腎上皮細胞系-EGFP;人胚腎細胞株-綠色熒光蛋白標記
種屬來源;人
組織來源;胚胎腎
生長特性;貼壁生長
細胞代數;p3-p8
特別注意;該細胞貼壁不牢,運輸過程中細胞會有脫落,如細胞脫落,請離心收集,消化后重新鋪瓶
背景簡介;Luciferase HEK-293細胞穩定表達螢光蛋白。該細胞株性狀穩定,培養時不需要添加維持。可用作螢光蛋白活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。 HEK-293細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞,HEK-293細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出,293 HEK-293細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現,Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293
[HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴的宿主,可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
生物等級;2
細胞規格;1x106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機構;ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
培養基;90% DMEM+10% FBS+PS+1. 0ug/ml
puro
培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
培養注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養基重懸 細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養皿和培養瓶?:提供細胞生長的環境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養基和血清?:特制的培養基包含各種營養物質,如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關信息,包括背景信息、傳代培養、冷凍保存等?。
?細胞形態觀察?:定期檢查細胞的形態和行為,確保細胞狀態健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
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