產品名稱
大鼠股骨頭微血管內皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
骨
生長特性
貼壁
細胞形態
內皮細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1681
用途
僅供科研實驗
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基：基礎培養基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：內皮細胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內狀態佳
消化液：0.25%胰蛋白酶，Accutase
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠股骨頭微血管內皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的生長培養基及正確的操作方法來培養，
細胞簡介：
大鼠股骨頭微血管內皮細胞分離自骨組織；股骨頭（caput
femoris）呈圓形，約占一圓球的2/3，其上完全為關節軟骨所覆蓋，在其頂部微后有一小窩，稱為股骨頭凹，為股骨頭韌帶附著處，股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結構為珊瑚狀，后微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞；骨微血管內皮細胞構成了骨內微血管的內襯，與骨內其他成分聯系密切，參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養物質轉運骨內代謝產物輸出及維持骨內微環境平衡方面具有重要作用。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內皮細胞采用混合膠原酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內皮細胞經CD31熒光鑒定，細胞純度可達90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養）后迅速置于的培養皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。
⑤培養：將培養瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態，繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養箱。每15min搖晃一次，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養基重懸，置于培養箱培養。
公司正在出售的產品：
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