
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
大鼠骨骼肌成纖維細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
骨骼肌組織
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1651
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
大鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官,有豐富的血管、分布,在軀體神經支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段,叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方,細胞多呈梭行,具有一定的方向性。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌成纖維細胞經Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
豚鼠血管**素2(ANGPT2)elisa檢測試劑盒
脂多糖誘導腫瘤壞死因子α抗體
LITAF
視網膜母細胞瘤結合蛋白8抗體
CtIP
大鼠胎盤生長因子(PLGF)elisa檢測試劑盒
C1-ESTERASE
大腸桿菌蛋白提取試劑盒50T
蛋白定量樣品預處理試劑
轉化神經突起蛋白1樣蛋白抗體
NRN1L
甲型流感病毒血凝素抗體
H1N1 Hemagglutinin 1
腫瘤細胞調亡素/死亡受體5抗體 Anti-TRAILR2/DR5/CD262
P選擇素抗體 Anti-P-selectin/CD62p
芳香酯酶1(對氧磷酶)抗體 Anti-PON1
跨膜蛋白SEMA4D抗體 Anti-SEMA4D/CD100
磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體
Phospho-CHEK2 (Thr387)
嗅覺受體5H15抗體
OR5H15
X射線修復交叉互補蛋白抗體 Anti-XRCC1
神經囊泡膜蛋白1抗體 Anti-NRSN1
視網膜色素變性蛋白1抗體 Anti-RP1/DCDC4A
神經元電壓門控鈉通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ抗體 Anti-SCN2B
大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)elisa分析檢測試劑盒
大鼠骨骼肌成纖維細胞α2 MG ELISA Kit
人含patatin樣磷脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)elisa分析檢測試劑盒
GBRA5_HUMAN; GAA 5; GAA5; GABRA 5; GABRA5; Gamma aminobutyric acid GABA A receptor alpha 5; Gamma aminobutyric acid GABA A receptor alpha 5 precursor; Gamma aminobutyric acid receptor alpha 5 subunit precursor GABA A receptor.
大鼠骨骼肌微血管內皮細胞
豬膀胱上皮細胞
ACHN人腎細胞腺癌細胞
A172人膠質母細胞瘤細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。