
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
大鼠海綿體平滑肌細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
海綿體組織
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1623
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
大鼠海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織;海綿體,又稱海綿體肌,是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅厚的白膜,內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中,在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系,破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠海綿體平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
小鼠球蛋白M(IgM)elisa檢測試劑盒
小鼠α1干擾素(IFN-α1)elisa分析檢測試劑盒
蛋白電泳2倍樣品處理液
?體外肌動蛋白(ACTIN)結合分子(binding molecules)檢測試劑盒
雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)elisa分析檢測試劑盒
大鼠葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)elisa檢測試劑盒
CD56-PE
土壤淀粉酶測試盒
通用型苜蓿花葉病病毒(Alfalfa Mosaic Virus;AMV)
GSK3β相互作用蛋白抗體 HSPC210/GSK3beta interaction protein
G蛋白偶聯受體37/帕金森相關內皮素受體樣受體抗體 GPR37
腦腸肽受體抗體 Ghrelin Receptor
釀酒酵母核孔蛋白NSP1抗體 Nsp1p
二酰基甘油酰基轉移酶2樣蛋白6抗體 DGAT2L6
防御素β-121/β-defensin 121抗體 DEFB121
陽離子通道精子相關蛋白1抗體 CATSPER
胰腺特異轉錄因子PTF1A抗體 PTF1A
SGEF蛋白抗體 SGEF
S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體 AMD1/SAMDC
源盒蛋白Meis2抗體 MEIS2
脫氧輔合酶蛋白抗體 DHPS
膠質細胞谷氨酸運載蛋白4抗體 EAAT4
精神分裂癥與犰狳重復基因抗體 ARVCF
6號染色體開放閱讀框206抗體 C6orf206
AF488標記人CD25單克隆抗體 human CD25/AF488
大鼠心營養素樣細胞因子1(CLCF1)elisa檢測試劑盒
大鼠海綿體平滑肌細胞谷氨酸含量測試盒
人血紅素加氧酶(HO)elisa檢測試劑盒
DCR1c; Dcr1 homolog (Drosophila)DCR1; Dcr1 homolog (Drosophila); Dicer 1; Dicer 1 ribonuclease type III; Dicer; DICER_HUMANv Dicer1v Endoribonuclease Dicer; Helicase moiv; Helicase with RNAse motif; HERNA.
大鼠頜下腺上皮細胞
豬肺成纖維細胞
BIU-87人膀胱癌細胞
A431(A-431)人表皮癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。