
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
兔肺微血管內皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
肺組織
生長特性
貼壁
細胞形態
內皮細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2006
用途
僅供科研實驗
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
兔肺微血管內皮細胞分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。微血管內皮細胞密切參與包括再生、發育、傷口等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調節液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔肺微血管內皮細胞采用組織貼塊法并結合內皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔肺微血管內皮細胞經CD31熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
SP-RELISAKit
雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒
E2 ELISA kit
人白介素31(IL-31)elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-31ELISAKit
小鼠白細胞介素1β(IL-1β)elisa檢測試劑盒
大鼠5羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織COLLAGEN II蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
人1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒免費代測
蛋白賴氨酸-6-氧化酶抗體
LOX
細胞色素B5還原酶樣蛋白抗體
CYB5RL
非紅細胞血影腦蛋白β2/spectrin β III抗體 Anti-SPTBN2/Beta III spectrin
松弛肽/松弛素抗體 Anti-Relaxin 1
神經顆粒素抗體 Anti-NG/Neurogranin
鋅指蛋白266抗體 Anti-ZNF266
癌/睪丸抗原11.4抗體
SPANXD/CT11.4
甲基CpG結合域蛋白3樣3抗體
MBD3L3
ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體 Anti-SMARCA2/BRM
磷酸化增殖細胞核抗原抗體 Anti-phosphos-PCNA (Tyr211)
乙酰化P53(Lys382)抗體 Anti-Acetyl-p53(K382)
轉化生長因子β1抗體(TGFβ1) Anti-TGF Beta 1
Cy5標記羊IgG(型對照)
兔肺微血管內皮細胞Goat IgG / Cy5
G蛋白偶聯受體82抗體
hUbc12; NEDD8 carrier protein; NEDD8 conjugating enzyme Ubc12; NEDD8 protein ligase; NEDD8-conjugating enzyme Ubc12; UBC-RS2; UBC12; UBC12_HUMAN; ube2m; ubiquitin carrier protein M; Ubiquitin conjugating enzyme E2 M; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 M; ubiquitin-protein ligase M; yeast UBC12 homolog.
兔附睪上皮細胞
小鼠肌腱成纖維細胞
Nthy-ori 3-1人甲狀腺正常細胞
ECC12人胃癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。