
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
兔羊膜間充質干細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
羊膜
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2250
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔羊膜間充質干細胞體外培養周期有限;建議使用配套的生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞簡介:
兔羊膜間充質干細胞分離自胎盤羊膜組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的,是一個重要的器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內層,與眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經及,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養因子的功能。
方法簡介:
實驗室分離的兔羊膜間充質干細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔羊膜間充質干細胞經CD44熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
人骨形成蛋白4(BMP4)elisa分析檢測試劑盒
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5色氨酸羥化酶2抗體 TPH2
9號染色體開放閱讀框5抗體 C9orf5
甲基化樣蛋白2B抗體 METTL2B
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Rho GTP酶激活蛋白26抗體 GRAF
SAFB蛋白抗體 SAFB
髓鞘堿性蛋白/磷脂堿性蛋白抗體 MBP
糖脂轉移蛋白結構域2抗體 GLTPD2
FRMD5蛋白抗體 FRMD5
GW182蛋白抗體 GW182
膜內蛋白酶5抗體 SPPL2C
腦環核苷酸門控通道蛋白1/HCN1抗體 HCN1
多發性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體 EXOSC10
泛素蛋白抗體 Ubiquitin
血漿激肽釋放酶輕鏈抗體 Plasma kallikrein light chain
胰腺彈性蛋白酶2B抗體 Elastase-2B
NAD激酶(NADK)測試盒
兔羊膜間充質干細胞小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa分析檢測試劑盒
大鼠脂肪酸去飽和酶1(FADS1)elisa檢測試劑盒
CLR11.1; NACHT, leucine rich repeat and PYD containing 10; NACHT, LRR and PYD domains containing protein 10; NACHT, LRR and PYD domains-containing protein 10; NAL10_HUMAN; NALP10; NLR family, pyrin domain containing 10; Nlrp10; NOD8; Nucleotide-binding oligomerization domain protein 8; Nucleotide-binding oligomerization domain, leucine rich repeat and pyrin domain containing 10; PAN5; PYNOD.
兔胰島細胞
兔牙髓干細胞
4T1小鼠乳腺癌細胞
HGC-27人胃癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。