
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
小鼠肺動脈內皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
肺動脈
生長特性
貼壁
細胞形態
內皮細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1761
用途
僅供科研實驗
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠肺動脈內皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞簡介:
小鼠肺動脈內皮細胞分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行。細胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。肺動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肺動脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠肺動脈內皮細胞經CD31熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
石斑魚卵黃蛋白原(VTG)elisa分析檢測試劑盒
脂肪酶家庭成員K抗體
LIPK
血型Lewis A抗原抗體
Blood Group Lewis a
小鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)elisa分析檢測試劑盒
大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析檢測試劑盒
組織肌酸激酶工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒
人肝素輔因子II-凝血酶(HCII-T)復合物elisa檢測試劑盒
NPIP樣蛋白1抗體
NPIP-like protein 1
9號染色體開放閱讀框23抗體
C9orf23
凝血調節蛋白/血栓調節素抗體 Anti-Thrombomodulin/CD141
蛋白磷酸酶-1B抗體 Anti-PTP1B
磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 Anti-PI 3 Kinase p85 beta
SAMD7蛋白抗體 Anti-SAMD7
磷酸化肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體
Phospho-INPPL1 (Tyr986 + Tyr987)
B細胞轉錄調節相關蛋白DRIL1抗體
DRIL1
腫瘤/睪丸抗原12家族2抗體 Anti-XAGE2
神經鈣傳感蛋白1抗體 Anti-NCS1/Frequenin
Rap2A抗體 Anti-Rap2A
電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα抗體 Anti-SCN3A
大鼠α肌動蛋白(α Actin)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肺動脈內皮細胞α Actin ELISA Kit
人和肽素(copeptin)elisa分析檢測試劑盒
PKC beta 1 + PKC beta 2; PKCB; PKC B; PKCB1; PKCB2; PRKCB; PRKCB I; PRKCB II; PRKCB1; PRKCB2; Protein kinase C beta 1; Protein kinase C beta 2; Protein kinase C beta; PKC beta 1; PKC beta 2; KPCB_HUMAN; MGC41878; PKC beta; PKC-B; PKC-beta; PRKC B; PRKC B1; Protein kinase C beta 1; Protein kinase C beta; Protein kinase C beta type.
小鼠肺動脈平滑肌細胞
兔小腸隱窩上皮細胞
E0771小鼠髓樣乳腺癌細胞
HPAC人胰腺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。