產品名稱
小鼠腹膜間皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
腹膜組織
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1827
用途
僅供科研實驗
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
小鼠腹膜間皮細胞分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細胞構成，藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、和神經組織經由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積大、配布復雜的漿膜，由皮及少量結締組織構成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續、移行，共同圍成不規則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮，是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構成間皮的細胞，正常大小約為15-25微米，細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護，不會互相磨損受傷。而間皮所生產的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質來達成，分泌物多半為細胞外基質、玻尿酸類物質。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腹膜間皮細胞采用混合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠腹膜間皮細胞經PCK、Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養）后迅速置于的培養皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。
⑤培養：將培養瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態，繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養箱。每15min搖晃一次，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養基重懸，置于培養箱培養。
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小鼠腹膜間皮細胞Mouse Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy3
溶質載體家族蛋白34成員A3抗體
HsSen2; MGC2776; MGC4440; SEN2; SEN2L; tRNA intron endonuclease Sen2; tRNA splicing endonuclease 2 homolog (SEN2, S. cerevisiae); tRNA splicing endonuclease subunit Sen2; TSEN 2; SEN2_HUMAN.
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