
產品名稱
小鼠視網膜色素上皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
視網膜組織
生長特性
貼壁
細胞形態
上皮細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1972
用途
僅供科研實驗
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力強。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構成,排列十分規則。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側面滑動,以填補死亡細胞下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。

公司正在出售的產品:
小鼠補體因子D(CFD)elisa檢測試劑盒
山羊C型鈉尿肽(CNP)elisa檢測試劑盒
正常人體腸組織微粒體組分(5毫克/毫升)
植物可溶性糖含量測試盒
大鼠維生素D結合蛋白(DBP)elisa檢測試劑盒
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大鼠肌鈣蛋白I(CTnI)elisa檢測試劑盒
組織CDK5/P25激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
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DQX1蛋白抗體 DQX1
ELOV3蛋白抗體 ELOV3
磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 Phospho-mTOR (Ser2481)
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 Phospho-MKP1 (Ser296)
層粘連相關多肽蛋白1抗體 LAP1
促代謝型谷氨酸受體1重組兔單克隆抗體 GRM1
鋅離子結合蛋白DTX2抗體 DTX2
鋅指蛋白378抗體 ZDHHC8
PDZ結構域PDZK8蛋白抗體 PDZD8
PerCP標記的腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體 ADORA2B, PerCP conjugated
神經細胞粘附分子2抗體 NCAM2
生長抑制因子基因1抗體 ING1
黑色素瘤相關抗原10抗體 MAGEA10
環指蛋白16抗體 RNF16
轉錄因子ONECUT2抗體 ONECUT2
組蛋白乙酰基轉移酶GCN5抗體 KAT2A/GCN5
大鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa分析檢測試劑盒
小鼠視網膜色素上皮細胞小鼠微管相關蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)elisa檢測試劑盒
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa分析檢測試劑盒
SCD_HUMAN; Stearoyl-CoA desaturase; EC:1.14.19.1; hSCD1; Acyl-CoA desaturase; Delta(9)-desaturase (Delta-9 desaturase); Fatty acid desaturase; FADS5; SCD1; SCDOS; MSTP008;
小鼠鞏膜成纖維細胞
兔髓核細胞
HEPA1-6小鼠肝癌細胞
HS683人腦膠質瘤細胞