
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
小鼠腦膜細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
腦膜組織
生長特性
貼壁
細胞形態
成纖維細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1946
用途
僅供科研實驗
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠腦膜細胞分離自腦膜組織;腦膜是顱骨與腦間的隔膜,一共有三層,由外向內為硬腦膜、蛛網膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦,參與神經系統的正常發育,能穩定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腦膜細胞采用胰蛋白酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腦膜細胞經Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
超微量總ATP酶測試盒測組織、普通細胞 50管/25樣 100管/50樣 比色法
大鼠基質金屬蛋白酶14(MMP-14)elisa檢測試劑盒免費代測
植物核蛋白/細胞器蛋白提取試劑盒100T
人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)elisa分析檢測試劑盒
純化人體RUNX3基因重組表達載體(pGEFP-RUNX3)
魚熱休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)elisa檢測試劑盒
大鼠利鈉肽受體1(NPR1)elisa檢測試劑盒
細胞短鏈羥脂酰脫氫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒
石斑魚卵黃蛋白原(VTG)elisa分析檢測試劑盒
視網膜母細胞瘤結合蛋白8抗體 CtIP
絲氨酸/精氨酸相關核基質蛋白3抗體 SRRM3
PCID1蛋白抗體 PCID1
PerCP-Cy5.5標記人CD57單克隆抗體 human CD57/PerCP-Cy5.5
組蛋白H3 K9甲基轉移酶抗體 SUV39H1
11號染色體開放閱讀框65抗體 C11orf65
褐黑素相關蛋白ART抗體 AGRP
環指蛋白142抗體 RNF142
鋅指蛋白775抗體 ZNF775
信號通路Wnt3a抗體 Wnt3a
程序性死亡配體2(CD273)單克隆抗體 PDCD1LG2
單極紡錘體蛋白激酶1抗體 TTK
EHD2蛋白抗體 EHD2
FAM118B蛋白抗體 FAM118B
磷酸化嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 Phospho-NCF4 (Thr154)
磷脂爭奪酶1抗體 Scramblase 1
組織基質金屬(MMP-13)活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠腦膜細胞人α乳清蛋白(α-La)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素22受體α2(IL2Rα2)elisa檢測試劑盒
ALPS 2; ALPS2; Apoptosis related cysteine peptidase; Apoptotic protease Mch 4; CASP 10; CASP10; CASP10 protein; Caspase 10 apoptosis related cysteine peptidase; Caspase 10 apoptosis related cysteine protease; Caspase10; FADD Like Ice 2; Fas Associated Death Domain Protein; FAS associated death domain protein interleukin 1B converting enzyme 2; FLICE 2; FLICE2; ICE Like Apoptotic Protease 4; Interleukin 1B Converting Enzyme 2; MCH 4; MCH4.
小鼠腦微血管內皮細胞
兔少突膠質細胞
P815小鼠肥大細胞瘤細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。