
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
人脾成纖維細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
脾臟組織
生長特性
貼壁培養
細胞形態
長梭形細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1454
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于人正常脾臟組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,貼壁培養。
推薦培養基
我們推薦使用 DELF原代成纖維細胞培養體系 作為體外培養的培養基。
細胞簡介:
脾是重要的器官,有造血、濾血、衰老血細胞及參與反應等功能。也是細胞遷移和接受抗原刺激后發生應到、產生效應分子的重要場所。脾由被膜、小梁、白髓、紅髓、邊緣區幾部分組成。其中的結締組織主要是由成纖維洗白構成。
公司正在出售的產品:
人結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa分析檢測試劑盒
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20%中性Formalin固著液
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絲氨酸蛋白酶37抗體 Protease serine 37
髓磷酯髓鞘蛋白1單克隆抗體 PLP1
PE標記人CD4單克隆抗體 Human CD4-PE
PSF2蛋白抗體 PSF2
19號染色體開放閱讀框44抗體 C19orf44
20號染色體開放閱讀框26抗體 C20orf26
磺基轉移酶抗體1C2抗體 SULT1C2
肌球蛋白重鏈9抗體 MYH9
嗅覺受體52E1抗體 OR52E1
血紅素抗體 Hemoglobin
蛋白激酶C mu型抗體 PRKD1/PKC mu
蛋白質磷酸酶2A亞基3抗體 PPP2R3
FAM58A蛋白抗體 FAM58A
FITC標記人/小鼠ZAP-70單克隆抗體 human/mouse ZAP-70/FITC
磷酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體 Phospho-p57 Kip2 (Thr310)
卵母細胞TRO抗體 Magphinin
汞離子檢測試劑盒
人脾成纖維細胞小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)elisa分析檢測試劑盒
大鼠腺苷受體A2a(ADORA2A)elisa檢測試劑盒
B220; CD 45; CD45; cd45 antigen; ec3.1.3.48; CD45R; GP180; GP180; GP 180; L CA; LCA; L-CA; Leukocyte common antigen; LY5; Protein tyrosine phosphatase receptor type C; Protein tyrosine phosphatase receptor type c polypeptide; protein tyrosine phosphatase, receptor type, C; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C; PTPRC; PTPRC_HUMAN; SCID due to PTPRC deficiency; T200; T200 glycoprotein; T200 leukocyte common antigen; Human homolog of severe combined immunodeficiency due to PTPRC deficiency.
人脾成纖維細胞
人毛囊干細胞
人肝癌細胞;HepAD38
NCI-H929人骨髓瘤細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。