
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
人韌帶成纖維細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
關節韌帶組織
生長特性
貼壁培養
細胞形態
成纖維樣細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1408
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于手術取得的正常人關節韌帶組織。
2)細胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養。
推薦培養基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細胞培養體系 作為體外培養的培養基。
細胞簡介:
韌帶屬于以彈性纖維為主的致密結締組織。粗大的彈性纖維或平行排列成束,如項韌帶和黃韌帶。韌帶白色帶狀的結締組織,質堅韌,有彈性,能把骨骼連接在一起,并能固定某些臟器如肝、脾、腎等的位置。韌帶附著于骨骼的可活動部分,但限制其活動范圍以免損傷。當遭受暴力,產生非生理性活動,韌帶被牽拉而超過其耐受力時,即會發生損傷。
公司正在出售的產品:
體液氧化應激活性氧(ROS)比色法測定試劑盒(單線態氧氣)
LYSMD2蛋白抗體
LYSMD2
細胞角蛋白3+12抗體
Cytokeratin 3+12
小鼠FMS樣激酶3配體(Flt3L)elisa檢測試劑盒
辣根過氧化物酶 EC1.11.1.7 100 mg/瓶
冰凍切片組織CASPASE-2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
磷酸果糖激酶(PFK)/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶測試盒
p105 CAF1蛋白抗體
p105 CAF1
丙型肝炎病毒NS5B抗體
Hepatitis C virus NS5B
腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體 Anti- TRAF2
配對盒基因5抗體 Anti-PAX5
磷酸化α型-過氧化酶活化受體抗體 Anti-phospho-PPAR alpha(Ser12)
5-羥色胺受體1F抗體 Anti-5HT1F Receptor/SR-1F
細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體
CDKN2B / p15 INK4b
丘腦分泌素受體2抗體
Orexin Receptor 2
鋅指蛋白449抗體 Anti-ZNF449
神經前體細胞表達蛋白1抗體 Anti-NEDD1
環指蛋白186抗體 Anti-RNF186
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK7抗體 Anti-SFRS7/9G8/SRp20
大鼠FMS樣激酶3配體(Flt3L)elisa分析檢測試劑盒
人韌帶成纖維細胞Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5.5
受體活性修飾蛋白3抗體
ABCC10; ATP binding cassette, sub family C (CFTR/MRP), member 10; ATP binding cassette, subfamily C, member 10; ATP-binding cassette sub-family C member 10; EST182763; mFLJ00002; MRP7; MRP7_HUMAN; Multidrug resistance associated protein 7; Multidrug resistance-associated protein 7; SIMRP7; SIMRP7.
人韌帶成纖維細胞
人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞
人黑色素瘤細胞;MNT-1
neuro-2a小鼠腦神經瘤細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。